ዜና

Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን።እየተጠቀሙበት ያለው የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የሲኤስኤስ ድጋፍ አለው።ለበለጠ ልምድ፣ የዘመነ አሳሽ እንድትጠቀም እንመክርሃለን (ወይም የተኳኋኝነት ሁነታን በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር አሰናክል)።እስከዚያው ድረስ ቀጣይ ድጋፍን ለማረጋገጥ ጣቢያውን ያለ ቅጦች እና ጃቫስክሪፕት እናቀርባለን።
ውጤታማ photosensitizers በተለይ የፎቶ ቴራፒ ውስጥ ሰፊ ክሊኒካዊ አጠቃቀም አስፈላጊ ናቸው.ነገር ግን፣ የተለመዱ የፎቶሰንሲታይዘር ዓይነቶች በአጠቃላይ በአጭር የሞገድ ርዝመት፣ በቂ የፎቶስታት አለመቻል፣ ምላሽ ሰጪ የኦክስጂን ዝርያዎች (ROS) የኳንተም ምርት ዝቅተኛ እና በድምር-የተፈጠረው ROS መጥፋት ይሰቃያሉ።እዚህ ጋር የአቅራቢያ ኢንፍራሬድ (NIR) ሱፕራሞለኩላር ፎተሴንቲዘር (RUDA) በራስ-መሰብሰብ በ Ru(II) -arene organometallic complexes በውሃ መፍትሄ የሚመጣ መሆኑን እንገልፃለን።RuDA ነጠላ ኦክሲጅን (1O2) በተዋሃደ ሁኔታ ውስጥ ብቻ ሊያመነጭ ይችላል፣ እና በነጠላ-ትሪፕሌት ሲስተም መካከል ያለው የመሻገሪያ ሂደት በከፍተኛ ሁኔታ በመጨመሩ ግልጽ የሆነ ውህደት-የተፈጠረ 1O2 ባህሪን ያሳያል።በ 808 nm ሌዘር ብርሃን ተግባር ስር ሩዲኤ የ1O2 ኳንተም ምርትን 16.4% (ኤፍዲኤ የተፈቀደ ኢንዶሲያኒን አረንጓዴ፡ ΦΔ=0.2%) እና ከፍተኛ የፎቶተርማል ልወጣ ቅልጥፍናን 24.2% (የንግድ ወርቅ ናኖሮድስ) እጅግ በጣም ጥሩ የፎቶ መረጋጋትን ያሳያል።: 21.0%, ወርቅ ናኖሼልስ: 13.0%).በተጨማሪም ፣ ጥሩ ባዮኬሚካላዊ ችሎታ ያላቸው RuDA-NPs በተሻለ ሁኔታ በእጢ ቦታዎች ላይ ሊከማቹ ይችላሉ ፣ ይህም በፎቶዳይናሚክ ቴራፒ ወቅት ጉልህ የሆነ የዕጢ ማገገሚያ በመፍጠር በ 95.2% በ Vivo ውስጥ የዕጢ መጠን መቀነስ።ይህ ድምርን የሚያሻሽል የፎቶዳይናሚክ ቴራፒ ምቹ የፎቶፊዚካል እና የፎቶ ኬሚካል ባህሪያት ያላቸውን ፎቶሴንቲዘርተሮችን ለማዳበር ስልት ይሰጣል።
ከተለመደው ሕክምና ጋር ሲነጻጸር, የፎቶዳይናሚክ ቴራፒ (ፒዲቲ) ለካንሰር ማራኪ ህክምና ነው, ምክንያቱም እንደ ትክክለኛ የቦታ ቁጥጥር, ወራሪ አለመሆን, ቸልተኛ የመድሃኒት መቋቋም እና የጎንዮሽ ጉዳቶችን መቀነስ 1,2,3.በብርሃን ጨረር ስር፣ ጥቅም ላይ የሚውሉት ፎተሰንሲታይዘር በከፍተኛ ምላሽ የሚሰሩ የኦክስጂን ዝርያዎችን (ROS) እንዲፈጥሩ ሊነቁ ይችላሉ፣ ይህም ወደ አፖፕቶሲስ/ኒክሮሲስ ወይም የበሽታ መከላከያ ምላሾች4፣5። ነገር ግን፣ እንደ ክሎሪን፣ ፖርፊሪን እና አንትራኩዊኖንስ ያሉ አብዛኛዎቹ የተለመዱ የፎቶሰንሲታይዘር ኬሚካሎች በአንጻራዊ ሁኔታ የአጭር የሞገድ ርዝመት (ድግግሞሽ <680 nm) ስላላቸው ባዮሎጂካል ሞለኪውሎች (ለምሳሌ ሄሞግሎቢን እና ሜላኒን) ውስጥ ስለሚገቡ ደካማ የብርሃን ዘልቆ እንዲገባ ያደርጋል። የሚታየው ክልል 6,7. ነገር ግን፣ እንደ ክሎሪን፣ ፖርፊሪን እና አንትራኩዊኖንስ ያሉ አብዛኛዎቹ የተለመዱ የፎቶሰንሲታይዘር ኬሚካሎች በአንጻራዊ ሁኔታ የአጭር የሞገድ ርዝመት (ድግግሞሽ <680 nm) ስላላቸው ባዮሎጂካል ሞለኪውሎች (ለምሳሌ ሄሞግሎቢን እና ሜላኒን) ውስጥ ስለሚገቡ ደካማ የብርሃን ዘልቆ እንዲገባ ያደርጋል። የሚታየው ክልል 6,7. Однако большинство обычных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, обладают относительно коротковолновым поглощением (частота < 680 нм), что приводит к плохому проникновению света из-за интенсивного поглощения биологических молекул (например, гемоглобина и меланина) в видимая область6,7. ነገር ግን፣ እንደ ክሎሪን፣ ፖርፊሪን እና አንትራኩይኖንስ ያሉ በጣም የተለመዱ የፎቶሰንሲታይዘር ኬሚካሎች በአንጻራዊ ሁኔታ አጭር የሞገድ ርዝመት አላቸው (<680 nm) በዚህም ምክንያት ባዮሎጂካል ሞለኪውሎች (ለምሳሌ ሄሞግሎቢን እና ሜላኒን) ወደ ሚታየው ክልል 6፣7 በመምጠታቸው ምክንያት ደካማ የብርሃን ዘልቆ እንዲገባ አድርጓል።然而, 大多数 传统 的 光敏剂, 如 二 氢 卟酚, 卟啉 二 卟酚 蒽醌, 具有 和 相对 蒽醌 蒽醌 吸收 吸收 吸收 (频率 <680 NM), 因此 由于 由于 生物 分子 分子 (如 如 血红 和 黑色素) 强烈 强烈,导致光穿透性差。然而, 大多数 传统 的 光敏剂, 二 氢 卟酚, 卟啉 卟酚 蒽醌, 具有 蒽醌 蒽醌 蒽醌 的 波长 波长 吸收 吸收 (频率 频率 <680 NM) 因此 由于 对 分子 分子 (血红 血红 和 黑色素) 的,,,,吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 HI导致光穿透性差。 Однако большинство традиционных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, имеют относительно коротковолновое поглощение (частота < 680 нм) из-за сильного поглощения биомолекул, таких как гемоглобин и меланин, что приводит к плохому проникновению света. ነገር ግን፣ እንደ ክሎሪን፣ ፖርፊሪን እና አንትራኩይኖንስ ያሉ አብዛኛዎቹ ባህላዊ ፎቶሴንቲዘርተሮች በአንጻራዊ ሁኔታ አጭር የሞገድ ርዝመት (ድግግሞሽ <680 nm) እንደ ሂሞግሎቢን እና ሜላኒን ያሉ ባዮሞለኪውሎችን በመምጠጥ ደካማ ብርሃን ውስጥ መግባትን ያስከትላል።የሚታይ አካባቢ 6.7.ስለዚህ, በ 700-900 nm "ቴራፒዩቲክ መስኮት" ውስጥ የሚንቀሳቀሱ የፎቶ ቴራፒ (የቅርብ-ኢንፍራሬድ) (NIR) የሚስቡ ፎቲሴንቲዘርተሮች ለፎቶ ቴራፒ ተስማሚ ናቸው.ከኢንፍራሬድ ብርሃን አጠገብ በትንሹ በባዮሎጂካል ቲሹዎች ስለሚዋጥ ወደ ጥልቅ ዘልቆ መግባት እና ያነሰ የፎቶ ጉዳት8,9 ሊያስከትል ይችላል.
እንደ አለመታደል ሆኖ፣ አሁን ያሉት NIR-የሚስብ ፎቲሴንቲዘርዘርስ በአጠቃላይ ደካማ የፎቶስታት አቅም፣ አነስተኛ ነጠላ ኦክሲጅን (1O2) የማመንጨት አቅም እና በድምር-የተፈጠሩ 1O2 quenching አላቸው፣ ይህም ክሊኒካዊ አተገባበራቸውን ይገድባል10,11.ምንም እንኳን የተለመዱ የፎቶፊዚካል እና የፎቶ ኬሚካል ባህሪያትን ለማሻሻል ከፍተኛ ጥረት ቢደረግም, እስካሁን ድረስ በርካታ ሪፖርቶች እንደዘገቡት NIR የሚስቡ የፎቶሰንሲታይዘር ችግሮች እነዚህን ሁሉ ችግሮች ሊፈቱ ይችላሉ.በተጨማሪም የፎቶን ሃይል በአቅራቢያው-IR ክልል ውስጥ በፍጥነት ስለሚቀንስ ከ 800 nm በላይ በሆነ ብርሃን ሲፈነጥቁ 1O212,13,14 ን ውጤታማ በሆነ መንገድ ለማመንጨት በርካታ የፎቶሰንሲታይዘር ተስፋዎች አሳይተዋል።ትሪፊኒላሚን (TFA) እንደ ኤሌክትሮን ለጋሽ እና [1,2,5] thiadiazole-[3,4-i] dipyrido[a,c]phenazine (TDP) እንደ ኤሌክትሮን ተቀባይ ቡድን ለጋሽ-ተቀባይ (DA) አይነት አንድ ክፍልን ቀለም ይቀባል. ማቅለሚያዎች , ቅርብ-ኢንፍራሬድ በመምጠጥ, በጠባብ ባንድ ክፍተት ምክንያት በቅርብ-ኢንፍራሬድ ባዮኢሜጂንግ II እና በፎቶተርማል ቴራፒ (PTT) ላይ በስፋት ጥናት ተደርጓል.ስለዚህ፣ የDA-አይነት ማቅለሚያዎች ለፒዲቲ ከአይአር አነሳሽነት ጋር ጥቅም ላይ ሊውሉ ይችላሉ፣ ምንም እንኳን ለፒዲቲ ፎቶሴንቲዘርዘር ብዙም ባይጠኑም።
የፎቶሴንቲዘርተሮች ከፍተኛ የኢንተር ሲስተም መሻገሪያ (አይኤስሲ) ውጤታማነት 1O2 እንዲፈጠር እንደሚያበረታታ ይታወቃል።የአይኤስሲ ሂደትን ለማራመድ የተለመደ ስትራቴጂ ከባድ አተሞችን ወይም ልዩ ኦርጋኒክ ክፍሎችን በማስተዋወቅ የፎቶሰንሲታይዘርን ስፒን-ኦርቢት ትስስር (SOC) ማሳደግ ነው።ሆኖም፣ ይህ አካሄድ አሁንም አንዳንድ ጉዳቶች እና ገደቦች አሉት19,20.በቅርብ ጊዜ የሱፕራሞለኩላር ራስን መሰብሰብ በሞለኪውላዊ ደረጃ ተግባራዊ የሆኑ ቁሳቁሶችን ለመሥራት ከታች ወደ ላይ ያለውን የማሰብ ችሎታ አቅርቧል, 21,22 በፎቶ ቴራፒ ውስጥ ብዙ ጥቅሞች አሉት: (1) በራሳቸው የተገጣጠሙ የፎቶሴንቲስቲተሮች ሪባን መዋቅሮችን የመፍጠር አቅም ሊኖራቸው ይችላል.በግንባታ ብሎኮች መካከል በተደራረቡ ምህዋሮች ምክንያት ጥቅጥቅ ያለ የኃይል ደረጃ ስርጭት ካላቸው የኤሌክትሮኒክስ መዋቅሮች ጋር ተመሳሳይ።ስለዚህ, በታችኛው ነጠላ አነቃቂ ሁኔታ (S1) እና በአጎራባች የሶስትዮሽ ሁኔታ (Tn) መካከል ያለው የኃይል ግጥሚያ ይሻሻላል, ይህም ለ ISC ሂደት 23, 24 ጠቃሚ ነው.(2) የሱፐራሞለኩላር ስብስብ በ intramolecular እንቅስቃሴ ገደብ ዘዴ (RIM) ላይ የተመሰረተ የጨረር-አልባ መዝናናትን ይቀንሳል, ይህም የ ISC ሂደትን 25, 26 ያበረታታል.(3) የሱፕራሞለኩላር ስብስብ የሞኖሜርን ውስጣዊ ሞለኪውሎች ከኦክሳይድ እና ከመበላሸት ሊከላከል ይችላል, በዚህም የፎቶሴንቲዘርን የፎቶስታቲስቲክስ ችሎታ በእጅጉ ያሻሽላል.ከላይ የተጠቀሱትን ጥቅሞች ከግምት ውስጥ በማስገባት የ PDT ድክመቶችን ለማሸነፍ የ supramolecular photosensitizer ስርዓቶች ተስፋ ሰጪ አማራጭ ሊሆኑ እንደሚችሉ እናምናለን.
Ru(II) -የተመሰረቱ ውስብስቦች ልዩ እና ማራኪ ባዮሎጂያዊ ባህሪያቶቻቸው28,29,30,31,32,33,34 በሽታዎችን በመመርመር እና በሕክምና ውስጥ ሊተገበሩ ለሚችሉ መተግበሪያዎች ተስፋ ሰጪ የሕክምና መድረክ ናቸው።በተጨማሪም፣ የተደሰቱባቸው ግዛቶች ብዛት እና የሩ(II) -የተመሰረቱ ሕንጻዎች ተስተካክለው የሚገኙ የፎቶፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያት በሩ(II) ላይ ለተመሰረቱ ፎቶሴንቲዘርዘር35,36,37,38,39,40 እድገት ትልቅ ጥቅም ይሰጣሉ።ሊጠቀስ የሚችል ምሳሌ በአሁኑ ጊዜ በ Phase II ክሊኒካዊ ሙከራዎች ውስጥ የጡንቻ ወራሪ የፊኛ ካንሰር (NMIBC) 41 ለማከም እንደ ፎቶሰንሲታይዘር ያለው ruthenium(II) polypyridyl complex TLD-1433 ነው።በተጨማሪም, ruthenium (II) arene organometalic complexes እንደ ኬሞቴራቲክ ወኪሎች ለካንሰር ሕክምና በሰፊው ጥቅም ላይ የሚውሉት ዝቅተኛ መርዛማነታቸው እና የመስተካከል ቀላልነት 42,43,44,45 ነው.የ Ru (II) -arene organometalic ኮምፕሌክስ ion ባህርያት የ DA ክሮሞፎረስን ደካማ መሟሟት በጋራ መሟሟት ብቻ ሳይሆን የ DA ክሮሞፎረስን ስብስብ ማሻሻልም ይችላሉ።በተጨማሪም ፣ የሩ (II) -አሬኔስ ኦርጋሜታል ውስብስቦች pseudooctahedral ግማሽ ሳንድዊች መዋቅር የ DA-አይነት ክሮሞፎሮች ኤች-ድምርን በጥብቅ ይከላከላል ፣ በዚህም የጄ-ድምር ምስረታ በቀይ የተቀየረ የመምጠጥ ባንዶችን ያመቻቻል።ነገር ግን፣ እንደ ዝቅተኛ መረጋጋት እና/ወይም ደካማ ባዮአቪላይዜሽን ያሉ የRu(II) -arene ሕንጻዎች ተፈጥሯዊ ጉዳቶች በሕክምናው ውጤታማነት እና በአሬን-ሩ(II) ሕንጻዎች እንቅስቃሴ ላይ ተጽዕኖ ሊያሳድሩ ይችላሉ።ይሁን እንጂ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የሩቲኒየም ውስብስብ ነገሮችን በአካላዊ ሽፋን ወይም በኮቫለንት ኮንጁጌሽን በመክተት እነዚህን ጉዳቶች ማሸነፍ ይቻላል.
በዚህ ሥራ፣ የ DA-conjugated complexes of Ru(II) -arene (RuDA) ከኤንአይአር ቀስቅሴ ጋር በDAD ክሮሞፎር እና በ Ru(II) -arene moiety መካከል ባለው ቅንጅታዊ ትስስር ሪፖርት እናደርጋለን።የተፈጠሩት ውስብስቦች እርስ በርስ በማይዋሃዱ መስተጋብር ምክንያት በውሃ ውስጥ ወደ ሜታሎሱፕራሞሌክላር ቬሴሴል ውስጥ ሊሰበሰቡ ይችላሉ።በተለይም የሱፕራሞለኪውላር ስብሰባ ለሩዲኤ በፖሊሜራይዜሽን የሚፈጠር ኢንተርናሽናል ሲስተም መሻገሪያ ባህሪያትን ሰጥቶታል ፣ይህም የ ISC ቅልጥፍናን በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል ፣ ይህም ለ PDT (ምስል 1 ሀ) በጣም ጥሩ ነበር።የቲዩመር ክምችትን ለመጨመር እና በ Vivo biocompatibility ውስጥ፣ FDA የተፈቀደለት ፕሉሮኒክ F127 (PEO-PPO-PEO) RuDA47,48,49 ን ለመፍጠር RuDA-NP nanoparticles (ምስል 1B) በጣም ቀልጣፋ PDT/ Dual- ለመፍጠር ጥቅም ላይ ውሏል። ሁነታ PTT ተኪ .በካንሰር የፎቶ ቴራፒ (ምስል 1C) RuDA-NP እርቃናቸውን አይጥ በMDA-MB-231 ዕጢዎች ለማከም የፒዲቲ እና የፒቲቲ ውጤታማነትን በ Vivo ውስጥ ለማጥናት ጥቅም ላይ ውሏል።
የሩዲኤ የፎቶፊዚካል ዘዴን በ monomeric እና በተዋሃዱ ቅርጾች ለካንሰር ፎቶቴራፒ ፣ የ B RuDA-NPs እና C RuDA-NPs ለ NIR-active PDT እና PTT ውህደት።
የTPA እና TDP ተግባራትን ያካተተ RuDA የተዘጋጀው በማሟያ ስእል 1 (ስእል 2A) በሚታየው አሰራር መሰረት ሲሆን RuDA በ 1H እና 13C NMR spectra፣ electrospray ionization mass spectrometry እና ኤሌሜንታል ትንተና (ተጨማሪ ምስሎች 2-4) ተለይቷል። ).የ RuDA ኤሌክትሮን ጥግግት ልዩነት ካርታ የዝቅተኛውን ነጠላ ሽግግር በጊዜ-ጥገኛ density functional theory (TD-DFT) የተሰላው የኃይል ማስተላለፊያ ሂደቱን ለማጥናት ነው።ተጨማሪ ምስል 5 ላይ እንደሚታየው የኤሌክትሮን ጥግግት በዋነኛነት ከTrefenylamine ወደ TDP ተቀባይ አሃድ ከፎቶኤክሳይት በኋላ የሚንሸራተት ሲሆን ይህም በተለመደው የውስጣዊ ቻርጅ ሽግግር (ሲቲ) ሽግግር ምክንያት ሊሆን ይችላል።
የኦሬ ኬሚካላዊ መዋቅር ለተለያዩ የዲኤምኤፍ እና የውሃ ሬሾዎች ድብልቅ የኦሬድ ስፔክትራ።C መደበኛ የመምጠጥ ዋጋዎች RuDA (800 nm) እና ICG (779 nm) እና ጊዜ 0.5 W ሴሜ-2 ከ 808 nm ሌዘር ብርሃን.D የ ABDA የፎቶግራፍ ማሽቆልቆል በ RuDA-induced 1O2 በዲኤምኤፍ/H2O ድብልቅ ከተለያዩ የውሃ ይዘቶች ጋር በሌዘር ጨረር በ 808 nm የሞገድ ርዝመት እና 0.5 W/cm2 ኃይል ይጠቁማል።
Abstract—UV-visible absorption spectroscopy የኦሬን ራስን የመገጣጠም ባህሪያት በዲኤምኤፍ እና በተለያዩ ሬሽዮዎች ውስጥ ያሉ የውሃ ውህዶችን ለማጥናት ጥቅም ላይ ውሏል።በለስ ላይ እንደሚታየው.2B፣ RuDA በዲኤምኤፍ ውስጥ ከ600 እስከ 900 nm ከፍተኛ የመምጠጥ ባንድ በ729 nm ያሳያል።የውሃውን መጠን መጨመር የኦሬ መምጠጥ ከፍተኛውን ወደ 800 nm ቀስ በቀስ ቀይ እንዲቀይር አድርጓል፣ ይህም በተሰበሰበው ስርዓት ውስጥ የጄ-ኦሬድ ኦፍ ኦሬጅን ያሳያል።በተለያዩ መሟሟቶች ውስጥ ያለው የRuDA የፎቶ luminescence ስፔክትራ በማሟያ ምስል 6 ይታያል።1050 nm በ CH2Cl2 እና CH3OH፣ በቅደም ተከተል።የ RuDA ትልቅ የስቶኮች ለውጥ (300 nm ገደማ) በአስደሳች ሁኔታ ጂኦሜትሪ ላይ ከፍተኛ ለውጥ እና ዝቅተኛ ኃይል ያላቸው ጉጉ ግዛቶች መፈጠርን ያሳያል።በCH2Cl2 እና CH3OH ውስጥ ያለው የኦሬድ luminescence ኳንተም ምርቶች 3.3 እና 0.6% እንዲሆኑ ተወስኗል።ነገር ግን በሜታኖል እና በውሃ ድብልቅ (5/95, v / v) ውስጥ ትንሽ የቀይ ለውጥ እና የኳንተም ምርት (0.22%) መቀነስ ተስተውሏል, ይህም በኦሬድ እራስ መሰብሰብ ምክንያት ሊሆን ይችላል. .
የ ORE ራስን መገጣጠም በዓይነ ሕሊናህ ለማየት፣ ውሃ ከጨመርን በኋላ በ ORE ውስጥ በሚታኖል መፍትሄ ላይ ያለውን የሞርሞሎጂ ለውጥ ለማየት ፈሳሽ አቶሚክ ኃይል ማይክሮስኮፒ (ኤኤፍኤም) ተጠቅመን ነበር።የውሃው ይዘት ከ 80% በታች በሚሆንበት ጊዜ, ምንም ግልጽ የሆነ ውህደት አልታየም (ተጨማሪ ምስል 7).ነገር ግን የውሃው ይዘት ወደ 90-95% በመጨመር አነስተኛ ናኖፓርተሎች ብቅ አሉ, ይህም የኦሬን ራስን መሰብሰብን ያመለክታሉ. መፍትሄ (ምስል 2C እና ተጨማሪ ምስል 8).በአንፃሩ የኢንዶሲያኒን አረንጓዴ (ICG as control) በ 779 nm በፍጥነት ወድቋል፣ ይህም የRuDA እጅግ በጣም ጥሩ የፎቶስታትነት ደረጃን ያሳያል።በተጨማሪም የ RuDA-NPs መረጋጋት በፒቢኤስ (pH = 5.4, 7.4 እና 9.0), 10% FBS እና DMEM (ከፍተኛ የግሉኮስ) በ UV-visible absorption spectroscopy በተለያዩ ጊዜያት ተፈትሸዋል.በተጨማሪ ምስል 9 ላይ እንደሚታየው፣ በ RuDA-NP የመምጠጥ ባንዶች ላይ ትንሽ ለውጦች በፒቢኤስ በ pH 7.4/9.0፣ FBS እና DMEM ተስተውለዋል፣ ይህም የRuDA-NP ጥሩ መረጋጋትን ያሳያል።ይሁን እንጂ በአሲዳማ መካከለኛ (рН = 5.4) የኦሬድ ሃይድሮሊሲስ ተገኝቷል.እንዲሁም ከፍተኛ አፈጻጸም ያላቸውን ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ (HPLC) ዘዴዎችን በመጠቀም የRuDA እና RuDA-NP መረጋጋትን ገምግመናል።በማሟያ ምስል 10 ላይ እንደሚታየው ሩዲኤ በመጀመሪያው ሰአት ውስጥ በሜታኖል እና በውሃ (50/50, v/v) ድብልቅ ውስጥ የተረጋጋ ሲሆን ከ 4 ሰዓታት በኋላ ሃይድሮሊሲስ ታይቷል.ነገር ግን፣ ለRuDA NPs ሰፊ ኮንካቭ-ኮንቬክስ ጫፍ ብቻ ታይቷል።ስለዚህ, ጄል ፐርሜሽን ክሮሞግራፊ (ጂፒሲ) በፒቢኤስ (pH = 7.4) ውስጥ የ RuDA NPs መረጋጋትን ለመገምገም ጥቅም ላይ ውሏል.ተጨማሪ ምስል 11 ላይ እንደሚታየው በተፈተኑ ሁኔታዎች ውስጥ ከ 8 ሰአታት በኋላ የመታቀፉን ሁኔታ, የ NP RuDA የከፍተኛው ቁመት, የከፍተኛው ስፋት እና የጫፍ ቦታ በከፍተኛ ሁኔታ አልተለወጠም, ይህም የ NP RuDA መረጋጋትን ያሳያል.በተጨማሪም፣ የTEM ምስሎች እንደሚያሳዩት የRuDA-NP nanoparticles ሞርፎሎጂ ከ24 ሰአታት በኋላ በተቀባ PBS ቋት (pH = 7.4፣ Supplementary Figure 12) ውስጥ ምንም ለውጥ እንዳልተቀየረ ያሳያል።
እራስን መሰብሰብ በኦሬ ላይ የተለያዩ ተግባራዊ እና ኬሚካላዊ ባህሪያትን ሊሰጥ ስለሚችል 9,10-anthracenediylbis (ሜቲኤሌይን) ዲማሎኒክ አሲድ (ABDA, አመላካች 1O2) በሜታኖል-ውሃ ድብልቅ ውስጥ መለቀቁን ተመልክተናል.ማዕድን በተለያየ የውሃ ይዘት50.በስእል 2D እና ተጨማሪ ምስል 13 እንደሚታየው የውሃው ይዘት ከ20% በታች በሆነበት ጊዜ የ ABDA መበላሸት አልታየም።የእርጥበት መጠን ወደ 40% ሲጨምር የ ABDA መበስበስ ተከስቷል፣ ይህም የ ABDA ፍሎረሰንት መጠን በመቀነሱ ነው።በተጨማሪም ከፍተኛ የውሃ መጠን በፍጥነት መበላሸት እንደሚያስከትል ተስተውሏል, ይህም RuDA ራስን መሰብሰብ አስፈላጊ እና ለ ABDA መበላሸት ጠቃሚ ነው.ይህ ክስተት ከዘመናዊው ACQ (በጥቅል-የሚፈጠር quenching) ክሮሞፎረስ በጣም የተለየ ነው።በ 808 nm የሞገድ ርዝመት በሌዘር ሲገለበጥ የ 1O2 RuDA በ 98% H2O/2% DMF ድብልቅ ውስጥ ያለው የኳንተም ምርት 16.4% ሲሆን ይህም ከ ICG (ΦΔ = 0.2%) 51 በ 82 እጥፍ ይበልጣል. አስደናቂ የትውልድ ቅልጥፍናን 1O2 RuDA በማሳየት ላይ።
ኤሌክትሮን የሚሽከረከር 2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidinone (TEMP) እና 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) እንደ ሽክርክሪት ወጥመዶች (Resonance spectroscopy (ESR)) የተገኙትን ዝርያዎች ለመለየት ጥቅም ላይ ይውላል. ኤኤፍኬበ RuDA.ተጨማሪ ምስል 14 ላይ እንደሚታየው 1O2 በጨረር ጊዜ በ0 እና 4 ደቂቃ ውስጥ እንደሚፈጠር ተረጋግጧል።በተጨማሪም, RuDA በጨረር ስር ከዲኤምፒኦ ጋር ሲታከል, የተለመደው ባለ አራት መስመር EPR ምልክት 1: 2: 2: 1 DMPO-OH · adduct ተገኝቷል, ይህም የሃይድሮክሳይል ራዲካልስ (OH ·) መፈጠሩን ያመለክታል.በአጠቃላይ፣ ከላይ ያሉት ውጤቶች የ RuDA ባለሁለት ዓይነት I/II ፎቶሴንሴቲሽን ሂደት የ ROS ምርትን ለማነቃቃት ያለውን ችሎታ ያሳያሉ።
በሞኖሜሪክ እና በተዋሃዱ ቅርጾች የRuDA ኤሌክትሮኒክስ ባህሪያትን በተሻለ ለመረዳት የሩዳ ሞለኪውላር ምህዋር በሞኖሜሪክ እና በዲሜሪክ ቅርጾች በዲኤፍቲ ዘዴ በመጠቀም ይሰላል።በለስ ላይ እንደሚታየው.3A፣ የሞኖሜሪክ ሩዳ ከፍተኛው የተያዘው ሞለኪውላር ምህዋር (HOMO) ከሊጋንድ የጀርባ አጥንት ጋር ተቀይሯል እና ዝቅተኛው ያልተያዘ ሞለኪውላር ምህዋር (LUMO) በTDP ተቀባይ ክፍል ላይ ያተኮረ ነው።በተቃራኒው፣ በዲሜሪክ HOMO ውስጥ ያለው የኤሌክትሮን መጠጋጋት በአንድ የሩዳ ሞለኪውል ጅማት ላይ ያተኮረ ሲሆን በ LUMO ውስጥ ያለው የኤሌክትሮን መጠጋጋት ደግሞ በሌላ የ RuDA ሞለኪውል ተቀባይ ክፍል ላይ ያተኮረ ሲሆን ይህም ሩዲኤ በዲመር ውስጥ እንዳለ ያሳያል።የሲቲ ባህሪያት.
A HOMO እና LUMO ኦፍ ኦር ሞኖሜሪክ እና ዲሜሪክ ቅርጾች ይሰላሉ።B ነጠላ እና ባለሶስት እጥፍ የኃይል ደረጃዎች በሞኖመሮች እና በዲመር።C ግምታዊ የRuDA ደረጃዎች እና ሊሆኑ የሚችሉ ISC ቻናሎች እንደ ሞኖሜሪክ ሲ እና ዲሜሪክ ዲ. ቀስቶች የ ISC ቻናሎችን ያመለክታሉ።
በሞኖሜሪክ እና በዲሜሪክ ፎርሞች ውስጥ የኤሌክትሮኖች እና ቀዳዳዎች ዝቅተኛ የኃይል ነጠላ የሩዳ አስደሳች ግዛቶች ስርጭት Multiwfn 3.852.53 ሶፍትዌርን በመጠቀም የተተነተነ ሲሆን እነዚህም በTD-DFT ዘዴ ይሰላሉ።ተጨማሪ መለያው ላይ እንደተገለጸው.በስእል 1-2 ላይ እንደሚታየው ሞኖሜሪክ አርዲኤ ቀዳዳዎች በሊጋንድ የጀርባ አጥንት ላይ በእነዚህ ነጠላ የደስታ ግዛቶች ውስጥ በብዛት ይቀመጣሉ, ኤሌክትሮኖች በአብዛኛው በቲዲፒ ቡድን ውስጥ ይገኛሉ, ይህም የሲቲ ውስጣዊ ባህሪያትን ያሳያል.በተጨማሪም፣ ለነዚ ነጠላ የተደሰቱ ግዛቶች፣ በቀዳዳዎች እና በኤሌክትሮኖች መካከል ብዙ ወይም ያነሰ መደራረብ አለ፣ ይህም እነዚህ ነጠላ የተደሰቱ ግዛቶች ከአካባቢያዊ ተነሳሽነት (LE) የተወሰነ አስተዋፅኦ እንደሚያደርጉ ይጠቁማል።ለዲመርስ ከኢንትራሞለኪውላር ሲቲ እና ኤል ባህሪያት በተጨማሪ በየግዛቶቹ በተለይም S3፣ S4፣ S7 እና S8 በ intermolecular CT ትንተና ላይ በመመስረት የተወሰነ መጠን ያለው የኢንተርሞለኩላር ሲቲ ባህሪያት ተስተውለዋል፣ የሲቲ ኢንተርሞለኩላር ሽግግር ዋና ዋናዎቹ ናቸው። (ተጨማሪ ሰንጠረዥ).3)
የሙከራ ውጤቶቹን የበለጠ ለመረዳት፣ በሞኖመሮች እና በዲመርስ መካከል ያለውን ልዩነት ለመዳሰስ የRuDA ጉጉት ግዛቶችን ባህሪያት የበለጠ መርምረናል (ተጨማሪ ሰንጠረዦች 4-5)።በስእል 3B ላይ እንደሚታየው የዲሜር ነጠላ እና የሶስትዮሽ ደስተኛ ግዛቶች የኃይል ደረጃዎች ከሞኖሜር በጣም ጥቅጥቅ ያሉ ናቸው, ይህም በ S1 እና Tn መካከል ያለውን የኃይል ልዩነት ለመቀነስ ይረዳል. የአይኤስሲ ሽግግሮች በትንሽ የኃይል ክፍተት (ΔES1-Tn <0.3 eV) በ S1 እና Tn54 መካከል ሊከናወኑ እንደሚችሉ ተዘግቧል። የአይኤስሲ ሽግግሮች በ S1 እና Tn54 መካከል ባለው አነስተኛ የኃይል ክፍተት (ΔES1-Tn <0.3 eV) ውስጥ እውን ሊሆኑ እንደሚችሉ ተዘግቧል። ኮብሻሎስ፣ ቺቶ ፔሬሆዳይ አይኤስሲ ሞት ባይት ሬሊዞቫኒ ከ ፕረዴላህ ንቦልሹ ኢነርጂ ቲዩብ ቲዩስ (ΔES1-5) የአይኤስሲ ሽግግሮች በ S1 እና Tn54 መካከል ባለው አነስተኛ የኃይል ክፍተት (ΔES1-Tn <0.3 eV) ውስጥ እውን ሊሆኑ እንደሚችሉ ተዘግቧል።据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn <0.3 eV）内实现。据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn <0.3 eV）内实现。 ሳኦብስሻሎስ፣ ቺቶ ፔሬሆድ አይኤስሲ ሞት ባይት ራሊዞቫን ፕረዴላህ ኔቦልሹይ ኢነርጂ ቲዩስ ስሌይ (ΔES1-3)። የአይኤስሲ ሽግግር በትንሽ የኃይል ክፍተት (ΔES1-Tn <0.3 eV) በ S1 እና Tn54 መካከል እውን ሊሆን እንደሚችል ተዘግቧል።በተጨማሪም፣ አንድ ምህዋር ብቻ፣ የተያዘ ወይም ያልተያዘ፣ ዜሮ ያልሆነ የኤስኦሲ ውህደትን ለማቅረብ በ bound singlet እና triplet states ሊለያይ ይገባል።ስለዚህ, የ excitation ኢነርጂ እና የምሕዋር ሽግግር ትንተና ላይ የተመሠረተ, ሁሉም በተቻለ ሰርጦች ISC ሽግግር የበለስ ውስጥ ይታያሉ.3ሲ፣ ዲ.በተለይም፣ በሞኖሜር ውስጥ አንድ የአይኤስሲ ቻናል ብቻ ይገኛል፣ ዲሜሪክ ፎርሙ ግን የአይኤስሲ ሽግግርን ሊያሳድጉ የሚችሉ አራት የአይኤስሲ ቻናሎች አሉት።ስለዚህ, ብዙ የ RuDA ሞለኪውሎች ሲዋሃዱ, የ ISC ቻናሎች የበለጠ ተደራሽ ይሆናሉ ብሎ ማሰብ ምክንያታዊ ነው.ስለዚህ, RuDA aggregates በነጠላ እና በሦስትዮሽ ግዛቶች ውስጥ ባለ ሁለት ባንድ ኤሌክትሮኒካዊ መዋቅሮችን ሊፈጥሩ ይችላሉ, በ S1 እና ባለው Tn መካከል ያለውን የኃይል ልዩነት በመቀነስ የ ISC ቅልጥፍናን በመጨመር የ 1O2 ትውልድን ያመቻቻል.
የስር አሠራሩን የበለጠ ለማብራራት፣ የ arene-Ru(II) complex (RuET) ማጣቀሻ ውህድ በማዋሃድ ሁለት የኤቲል ቡድኖችን በሁለት ትሪፊኒላሚን ፊኒል ቡድኖች በሩዳ (ምስል 4A፣ ለሙሉ ባህሪይ፣ ESI ይመልከቱ፣ ተጨማሪ 15) -21 ) ከለጋሽ (ዲቲኢላሚን) ወደ ተቀባይ (TDF), RuET እንደ RuDA ተመሳሳይ የውስጠ-ሞለኪውላር ሲቲ ባህሪያት አሉት.እንደተጠበቀው፣ በዲኤምኤፍ ውስጥ ያለው የ RuET የመምጠጥ ስፔክትረም ዝቅተኛ የኃይል ክፍያ ማስተላለፊያ ባንድ በ600-1100 nm ክልል ውስጥ በአቅራቢያው ባለው የኢንፍራሬድ ክልል ውስጥ ጠንካራ የመጠጣት ባንድ አሳይቷል (ምስል 4B)።በተጨማሪም ፣ የRuET ውህደት የውሃ ይዘትን በመጨመር ታይቷል ፣ ይህም በከፍተኛው የመምጠጥ ቀይ ለውጥ ላይ ተንፀባርቋል ፣ ይህም በፈሳሽ AFM ምስል የበለጠ የተረጋገጠ (ተጨማሪ ምስል 22)።ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት RuET, ልክ እንደ RuDA, ውስጠ-ሞለኪውላር ግዛቶችን መፍጠር እና እራሱን ወደ የተዋሃዱ መዋቅሮች ሊሰበስብ ይችላል.
የ RuET ኬሚካዊ መዋቅር.B የ RuET የተለያዩ የዲኤምኤፍ እና የውሃ ሬሾዎች ድብልቅ ውስጥ የመምጠጥ እይታ።ሴራዎች C EIS Nyquist ለ RuDA እና RuET።የ 808 nm የሞገድ ርዝመት ያለው የጨረር ጨረር ተጽዕኖ ስር የሩዳ እና የሩኢኢቲ የፎቶ ወቅታዊ ምላሾች D።
በRUET ፊት ያለው የ ABDA ፎቶግራፊ መጥፋት 808 nm የሞገድ ርዝመት ባለው ሌዘር በጨረር ተገምግሟል።በሚያስደንቅ ሁኔታ, በተለያዩ የውሃ ክፍልፋዮች ውስጥ የ ABDA መበላሸት አልታየም (ተጨማሪ ምስል 23).ሊሆን የሚችልበት ምክንያት የ ethyl ሰንሰለት ቀልጣፋ የኢንተር ሞለኪውላር ቻርጅ ማስተላለፍን የማያበረታታ በመሆኑ ሩኢኢቲ ባንድድ ኤሌክትሮኒክ መዋቅርን በብቃት መመስረት ስለማይችል ነው።ስለዚህ የRuDA እና RuET የፎቶኤሌክትሮኬሚካላዊ ባህሪያትን ለማነፃፀር ኤሌክትሮኬሚካላዊ እክል ስፔክትሮስኮፒ (EIS) እና ጊዜያዊ የፎቶcurrent መለኪያዎች ተካሂደዋል።በኒኩዊስት ሴራ (ምስል 4C) መሰረት RuDA ከRuET በጣም ያነሰ ራዲየስ ያሳያል፣ ይህ ማለት RuDA56 ፈጣን የኢንተር ሞለኪውላር ኤሌክትሮን ትራንስፖርት እና የተሻለ ኮንዳክሽን አለው ማለት ነው።በተጨማሪም የሩዲኤ (photocurrent density) ከ RuET (ምስል 4D) በጣም ከፍ ያለ ነው, ይህም የ RuDA57 የተሻለ ክፍያ ማስተላለፍን ያረጋግጣል.ስለዚህ በኦሬ ውስጥ ያለው የፔኒል ቡድን ትራይፕኒላሚን ኢንተርሞለኪውላር ቻርጅ ማስተላለፍ እና የባንድ ኤሌክትሮኒክስ መዋቅርን በመፍጠር ረገድ ትልቅ ሚና ይጫወታል።
የቲሞር ክምችትን ለመጨመር እና በ Vivo ባዮኬሚካላዊነት, RuDAን በF127 የበለጠ ጨምረነዋል.የRuDA-NPs አማካኝ የሃይድሮዳይናሚክ ዲያሜትር 123.1 nm ከጠባብ ስርጭት (PDI = 0.089) በተለዋዋጭ የብርሃን መበታተን (ዲኤልኤስ) ዘዴ (ምስል 5A) በመጠቀም የእጢ ማጠራቀምን እና የመቆየት አቅምን በመጨመር ተወስኗል።EPR) ውጤት.የTEM ምስሎች እንደሚያሳዩት ኦሬ ኤንፒዎች አንድ ወጥ የሆነ ክብ ቅርጽ ያላቸው እና አማካኝ ዲያሜትራቸው 86 nm ነው።በተለይም የRuDA-NPs ከፍተኛው የመምጠጥ መጠን በ800 nm (ተጨማሪ ምስል 24) ታይቷል፣ ይህ የሚያመለክተው RuDA-NPs የ RuDAs እራስን የመገጣጠም ተግባራትን እና ባህሪያትን ሊይዝ ይችላል።ለኤንፒ ኦሬ የተሰላው የ ROS ኳንተም ምርት 15.9% ሲሆን ይህም ከኦሬ ጋር ሲነጻጸር የሩዳ ኤንፒኤስ የፎቶተርማል ባህሪያት በሌዘር ጨረሮች በ 808 nm የሞገድ ርዝመት በኢንፍራሬድ ካሜራ ተጠቅመዋል።በለስ ላይ እንደሚታየው.5B,C, የቁጥጥር ቡድን (PBS ብቻ) ትንሽ የሙቀት መጠን መጨመር, የ RuDA-NPs መፍትሄ የሙቀት መጠን እየጨመረ በሚሄድ የሙቀት መጠን (ΔT) ወደ 15.5, 26.1 እና 43.0 ° ሴ በፍጥነት ጨምሯል.ከፍተኛ ክምችት 25፣ 50 እና 100 μM በቅደም ተከተል ነበር፣ ይህም የRuDA NPs ጠንካራ የፎቶተርማል ውጤት ያሳያል።በተጨማሪም የ RuDA-NP የፎቶተርማል መረጋጋትን ለመገምገም እና ከ ICG ጋር ለማነፃፀር የማሞቂያ / የማቀዝቀዣ ዑደት መለኪያዎች ተወስደዋል.የ Ore NPs የሙቀት መጠን ከአምስት ማሞቂያ / ማቀዝቀዣ ዑደቶች በኋላ አልቀነሰም (ምስል 5D) ይህም የ Ore NPs እጅግ በጣም ጥሩ የፎቶተርማል መረጋጋትን ያሳያል።በአንጻሩ፣ ICG የፎቶተርማል ሙቀት መጠን በተመሳሳይ ሁኔታ ውስጥ ከመጥፋቱ እንደታየው ዝቅተኛ የፎቶተርማል መረጋጋትን ያሳያል።በቀድሞው ዘዴ58 መሠረት የሩዳ-ኤንፒ የፎቶተርማል ልወጣ ውጤታማነት (ፒሲኢ) በ 24.2% ይሰላል ፣ ይህም አሁን ካሉት የፎቶተርማል ቁሳቁሶች እንደ ወርቅ ናኖሮድስ (21.0%) እና ወርቅ ናኖሼል (13.0%) 59 ከፍ ያለ ነው።ስለዚህ, NP Ore በጣም ጥሩ የፎቶተርማል ባህሪያትን ያሳያል, ይህም የ PTT ወኪሎችን ተስፋ ሰጭ ያደርጋቸዋል.
የ DLS እና TEM የ RuDA NPs ምስሎች ትንተና (ውስጠ-ገብ)።በ 808 nm የሞገድ ርዝመት (0.5 ዋ ሴሜ -2) ለጨረር ጨረር የተጋለጡ የተለያዩ የ RuDA NPs የሙቀት ምስሎች።C Photothermal ልወጣ ጥምዝ የተለያዩ ማዕድን NPs, መጠናዊ ውሂብ ናቸው.B. D የ ORE NP እና ICG የሙቀት መጨመር ከ 5 የሙቀት ማቀዝቀዣ ዑደቶች በላይ።
በMDA-MB-231 የሰው ልጅ የጡት ካንሰር ሕዋሳት ላይ የRuDA NPs የፎቶሳይቶክሲክ መጠን በብልቃጥ ውስጥ ተገምግሟል።በለስ ላይ እንደሚታየው.6A፣ B፣ RuDA-NPs እና RuDA irradiation በሌለበት ጊዜ ቸልተኛ የሆነ ሳይቶቶክሲካዊነትን አሳይተዋል፣ ይህም የRuDA-NPs እና RuDA ዝቅተኛ የጨለማ መርዝን ያሳያል።ነገር ግን በ 808 nm የሞገድ ርዝመት ለጨረር ጨረር ከተጋለጡ በኋላ RuDA እና RuDA NPs በ MDA-MB-231 የካንሰር ሕዋሳት ላይ IC50 እሴቶች (ግማሽ-ከፍተኛው የመከለያ ክምችት) 5.4 እና 9.4 μM ያላቸው ጠንካራ የፎቶሳይቶክሲክሳይድነት አሳይተዋል ። RuDA-NP እና RuDA ለካንሰር የፎቶ ቴራፒ አቅም እንዳላቸው።በተጨማሪም, የሩዲኤ-ኤንፒ እና የሩዲኤ (RuDA) የፎቶሳይቶክሲክ ይዘት በቫይታሚን ሲ (ቪሲ) ውስጥ, የ ROS ስካቬንቸር, በብርሃን-ተነሳሽነት በሳይቶቶክሲክ ውስጥ ያለውን ሚና ለማብራራት ተጨማሪ ምርመራ ተደረገ.በግልጽ ለማየት እንደሚቻለው, ቪሲ ከተጨመረ በኋላ የሕዋስ አዋጭነት ጨምሯል, እና የ IC50 እሴቶች RuDA እና RuDA NPs 25.7 እና 40.0 μM ነበሩ, ይህም በ RuDA እና RuDA NPs ፎቶሳይቶክሲክ ውስጥ የ ROS ጠቃሚ ሚና ያረጋግጣል.የሩዳ-ኤንፒስ እና ሩዲኤ በ MDA-MB-231 የካንሰር ህዋሶች ውስጥ በብርሃን የተፈጠረ ሳይቶቶክሲካዊነት በካልሴይን AM (አረንጓዴ ፍሎረሰንት ለቀጥታ ሴሎች) እና ፕሮፒዲየም አዮዳይድ (PI, ለሞቱ ሴሎች ቀይ ፍሎረሰንት) በመጠቀም የቀጥታ / የሞቱ ሴል ቀለም.በሴሎች የተረጋገጠ) እንደ ፍሎረሰንት መመርመሪያዎች.በስእል 6C እንደሚታየው፣ በRuDA-NP ወይም RuDA የታከሙ ህዋሶች ያለ irradiation አዋጭ ሆነው ይቆያሉ፣ በኃይለኛ አረንጓዴ ፍሎረሰንስ እንደሚታየው።በተቃራኒው ፣ በሌዘር ጨረር ስር ፣ ቀይ ፍሎረሰንት ብቻ ታይቷል ፣ ይህም የ RuDA ወይም RuDA NPs ውጤታማ የፎቶሳይቶቶክሲክሽንነት ያረጋግጣል።አረንጓዴ ፍሎረሰንት ቪሲ ሲጨመር መታየቱ ትኩረት የሚስብ ነው፣ ይህ የሚያሳየው የRuDA እና RuDA NPs የፎቶሳይቶክሲክ ይዘት መጣስ ነው።እነዚህ ውጤቶች ከ in vitro photocytotoxicity assays ጋር ይጣጣማሉ።
በMDA-MB-231 ሴሎች ውስጥ የVc (0.5 mM) መኖር ወይም አለመገኘት የ A RuDA- እና B RuDA-NP ሴሎች ልክ መጠን-ጥገኛ አዋጭነት።የስህተት አሞሌዎች፣ አማካኝ ± መደበኛ መዛባት (n = 3)። ያልተጣመሩ፣ ባለ ሁለት ጎን t ሙከራዎች *p <0.05፣ **p <0.01፣ እና ***p <0.001። ያልተጣመሩ፣ ባለ ሁለት ጎን t ሙከራዎች *p <0.05፣ **p <0.01፣ እና ***p <0.001። Непарные двусторонние t-критерии * ገጽ <0,05, ** p <0,01 እና *** p <0,001. ያልተጣመሩ ባለ ሁለት ጭራ ቲ- ሙከራዎች *p<0.05፣ **p<0.01 እና ***p<0.001።未配对的双边t 检验*p <0.05,**p <0.01 和***p <0.001.未配对的双边t 检验*p <0.05,**p <0.01 和***p <0.001. Непарные двусторонние t-teсты * p <0,05, ** p <0,01 እና *** p <0,001. ያልተጣመሩ ባለ ሁለት ጭራ ቲ- ሙከራዎች *p<0.05፣ **p<0.01 እና ***p<0.001።ሐ የቀጥታ/የሞተ ሕዋስ ቀለም ትንተና Calcein AM እና propidium iodide እንደ ፍሎረሰንት መመርመሪያዎች በመጠቀም።የመጠን አሞሌ፡ 30µmከእያንዳንዱ ቡድን የሶስት ባዮሎጂካል ድግግሞሾች ተወካይ ምስሎች ይታያሉ.D Confocal fluorescence ምስሎች በ MDA-MB-231 ሴሎች ውስጥ የ ROS ምርት በተለያዩ የሕክምና ሁኔታዎች ውስጥ.አረንጓዴ የዲሲኤፍ ፍሎረሰንት የ ROS መኖሩን ያሳያል.ከ 808 nm የሞገድ ርዝመት ጋር በሌዘር በ 0.5 W / cm2 ኃይል ለ 10 ደቂቃዎች (300 ጄ / ሴሜ 2).የመጠን አሞሌ፡ 30µmከእያንዳንዱ ቡድን የሶስት ባዮሎጂካል ድግግሞሾች ተወካይ ምስሎች ይታያሉ.E ፍሰት ሳይቶሜትሪ RuDA-NPs (50 μM) ወይም RuDA (50 μM) ሕክምና ትንተና ከ 808 nm ሌዘር (0.5 W ሴሜ-2) ጋር ወይም ያለ ቪሲ (0.5 ሚሜ) መኖር እና አለመኖር ለ 10 ደቂቃ።ከእያንዳንዱ ቡድን የሶስት ባዮሎጂካል ድግግሞሾች ተወካይ ምስሎች ይታያሉ.F Nrf-2፣ HSP70 እና HO-1 የ MDA-MB-231 ህዋሶች በRuDA-NPs (50 µM) ከ 808 nm laser irradiation (0.5 W ሴሜ-2፣ 10 ደቂቃ፣ 300 J ሴሜ-2) ጋር፣ ሴሎች ይገልጻሉ 2).ከእያንዳንዱ ቡድን የሁለት ባዮሎጂካል ድግግሞሾች ተወካይ ምስሎች ይታያሉ.
በ MDA-MB-231 ሕዋሳት ውስጥ ያለው የውስጠ-ህዋስ ROS ምርት በ 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA) ማቅለሚያ ዘዴ በመጠቀም ተመርምሯል.በለስ ላይ እንደሚታየው.6D፣ RuDA-NPs ወይም RuDA የሚታከሙ ህዋሶች በ808 nm ሌዘር ሲሞሉ የተለየ አረንጓዴ ፍሎረሰንት አሳይተዋል፣ ይህም RuDA-NPs እና RuDA ROS የማመንጨት ብቃት እንዳላቸው ያሳያል።በተቃራኒው, ብርሃን በሌለበት ወይም በቪሲው ውስጥ, የሴሎች ደካማ የፍሎረሰንት ምልክት ብቻ ታይቷል, ይህም ትንሽ የ ROS መፈጠርን ያመለክታል.በRuDA-NP ሕዋሳት ውስጥ ያሉ የውስጠ-ህዋስ ROS ደረጃዎች እና RUDA-የታከሙ ኤምዲኤ-ኤምቢ-231 ሴሎች ተጨማሪ በፍሰት ሳይቶሜትሪ ተወስነዋል።በተጨማሪ ምስል 25 ላይ እንደሚታየው በRuDA-NPs እና RuDA በ 808 nm laser irradiation የሚመነጨው አማካኝ የፍሎረሰንት ኢንቴንሽን (MFI) ከቁጥጥር ቡድን ጋር ሲነፃፀር በ 5.1 እና 4.8 ጊዜ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል።አቅም.ነገር ግን፣ በRuDA-NP ወይም MDA-MB-231 ሕዋሳት ውስጥ ያሉት የውስጠ-ሴሉላር ROS ደረጃዎች በRuDA የታከሙ ከሌዘር ጨረር ውጭ ወይም በቪሲ ፊት ከቁጥጥር ጋር የሚነፃፀሩ ናቸው፣ ይህም ከኮንፎካል ፍሎረሰንስ ትንታኔ ውጤቶች ጋር ተመሳሳይ ነው።
ማይቶኮንድሪያ የ Ru(II) -arene complexes60 ዋና ኢላማ እንደሆነ ታይቷል።ስለዚህ, የ RuDA እና RuDA-NPs ንዑስ ሴሉላር አካባቢያዊነት ተመርምሯል.በማሟያ ምስል 26 ላይ እንደሚታየው RuDA እና RuDA-NP ተመሳሳይ የሴሉላር ማከፋፈያ መገለጫዎችን በሚቶኮንድሪያ ውስጥ ከፍተኛ ክምችት (62.5 ± 4.3 እና 60.4 ± 3.6 ng/mg ፕሮቲን በቅደም ተከተል) ያሳያሉ።ሆኖም ግን, በ Ore እና NP Ore (3.5 እና 2.1%) የኑክሌር ክፍልፋዮች ውስጥ አነስተኛ መጠን ያለው ሩ ብቻ ተገኝቷል.የቀረው የሴል ክፍልፋይ ቀሪ ሩተኒየም ይዟል: 31.7% (30.6 ± 3.4 ng / mg ፕሮቲን) ለ RuDA እና 42.9% (47.2 ± 4.5 ng / mg ፕሮቲን) ለ RuDA-NPs.ባጠቃላይ ኦሬ እና ኤንፒ ኦሬ በዋናነት ሚቶኮንድሪያ ውስጥ ይከማቻሉ።የ mitochondrial dysfunctionን ለመገምገም JC-1 እና MitoSOX ቀይ ቀለምን በመጠቀም ሚቶኮንድሪያል ሽፋን እምቅ አቅም እና ሱፐርኦክሳይድ የማምረት አቅምን ለመገምገም ተጠቀምን።ተጨማሪ ምስል 27 ላይ እንደሚታየው ኃይለኛ አረንጓዴ (JC-1) እና ቀይ (ሚቶሶክስ ቀይ) ፍሎረሰንስ በሁለቱም RuDA እና RuDA-NPs በ 808 nm laser irradiation ስር በሚታከሙ ሴሎች ውስጥ ተስተውሏል ይህም ሁለቱም RuDA እና RuDA-NPs በጣም ፍሎረሰንት መሆናቸውን ያሳያል። የ mitochondrial membrane depolarization እና ሱፐርኦክሳይድ ምርትን ውጤታማ በሆነ መንገድ ሊያመጣ ይችላል.በተጨማሪም የሕዋስ ሞት ዘዴ የሚወሰነው በ V-FITC/propidium iodide (PI) ፍሰት ሳይቶሜትሪ ላይ የተመሠረተ ትንተና በመጠቀም ነው።በስእል 6E ላይ እንደሚታየው፣ በ 808 nm laser ሲፈነዳ፣ RuDA እና RuDA-NP በMDA-MB-231 ሴሎች ውስጥ ቀደምት የአፖፕቶሲስ መጠን (ከታች ቀኝ ኳድራንት) ከPBS ወይም PBS plus laser ጋር ሲነፃፀር በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል።የተሰሩ ሴሎች.ነገር ግን ቪሲ ሲጨመር የ RuDA እና RuDA-NP የአፖፕቶሲስ መጠን ከ 50.9% እና 52.0% ወደ 15.8% እና 17.8% በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል, ይህም የ ROS በ RuDA እና RuDA-NP የፎቶሳይቶቶክሲክ አሲድ ውስጥ ያለውን ጠቃሚ ሚና ያረጋግጣል..በተጨማሪም በሁሉም የተፈተኑ ቡድኖች (የላይኛው ግራ ኳድራንት) ላይ ትንሽ የኔክሮቲክ ሴሎች ተስተውለዋል፣ ይህም አፖፕቶሲስ በ RuDA እና RuDA-NPs የተከሰተ ዋነኛው የሕዋስ ሞት ዓይነት ሊሆን እንደሚችል ይጠቁማል።
የኦክስዲቲቭ ጭንቀት መጎዳት የአፖፕቶሲስ ዋነኛ መመዘኛ ስለሆነ ከኤrythroid 2, factor 2 (Nrf2) 62 ጋር የተያያዘው የኒውክሌር ሁኔታ, የፀረ-አንቲኦክሲዳንት ስርዓት ቁልፍ ተቆጣጣሪ, በ RuDA-NPs-በታከመ MDA-MB-231 ውስጥ ተመርምሯል.በ irradiation የተነሳ የRuDA NPs የድርጊት ዘዴ።በተመሳሳይ ጊዜ የታችኛው ፕሮቲን ሄሜ ኦክሲጅንሴስ 1 (HO-1) መግለጫም ተገኝቷል.በስእል 6F እና ተጨማሪ ምስል 29 ላይ እንደሚታየው, RuDA-NP-mediated phototherapy ከፒቢኤስ ቡድን ጋር ሲነጻጸር Nrf2 እና HO-1 አገላለጽ ደረጃዎችን ጨምሯል, ይህ የሚያመለክተው RuDA-NPs የኦክሳይድ ውጥረት ምልክት መንገዶችን ሊያበረታታ ይችላል.በተጨማሪም, የ RuDA-NPs63 የፎቶተርማል ተፅእኖን ለማጥናት, የሙቀት ድንጋጤ ፕሮቲን Hsp70 መግለጫም ተገምግሟል.በRuDA-NPs + 808 nm laser irradiation የታከሙ ሴሎች ከሌሎቹ ሁለት ቡድኖች ጋር ሲነፃፀሩ የ Hsp70 ን መግለጫ እንዳሳዩ ግልፅ ነው ፣ ይህም ለሃይሞሬሚያ ሴሉላር ምላሽ ያሳያል።
አስደናቂው በብልቃጥ ውጤቶቹ የRuDA-NP ራቁት አይጥ ከMDA-MB-231 እጢዎች ጋር በቪቮ አፈጻጸም እንድንመረምር አነሳሳን።የ RuDA NPs ቲሹ ስርጭት በጉበት፣ ልብ፣ ስፕሊን፣ ኩላሊት፣ ሳንባ እና እጢዎች ውስጥ ያለውን የሩተኒየም ይዘት በመወሰን ተምሯል።በለስ ላይ እንደሚታየው.7A፣ በተለመደው የአካል ክፍሎች ውስጥ ያለው የኦሬ ኤንፒ ከፍተኛ ይዘት በመጀመሪያ ምልከታ ጊዜ (4 ሰአታት) ታየ፣ ከፍተኛው ይዘት ደግሞ በመርፌ ከተከተቡ ከ 8 ሰአታት በኋላ በቲሹ ቲሹዎች ውስጥ ተወስኗል፣ ምናልባትም በኦሬ ኤንፒዎች ምክንያት።የኤል.ኤፍ.ኤፍ.በስርጭቱ ውጤት መሰረት, ከ NP ኦር ጋር የሚደረግ ሕክምና በጣም ጥሩው የቆይታ ጊዜ ከአስተዳደሩ ከ 8 ሰዓታት በኋላ ተወስዷል.በእብጠት ቦታዎች ውስጥ የ RuDA-NPs የመከማቸትን ሂደት ለማሳየት የሩዳ-ኤንፒኤስ የፎቶአኮስቲክ (PA) ባህሪያት ከክትባት በኋላ በተለያዩ ጊዜያት የ RuDA-NPs የ PA ምልክቶችን በመመዝገብ ቁጥጥር ይደረግባቸዋል።በመጀመሪያ፣ የ RuDA-NP intratumoral RuDA-NP ከገባ በኋላ የፒኤ ሲግናል የቲሞር ቦታ ምስሎችን በመመዝገብ ይገመገማል።በተጨማሪ ምስል 30 ላይ እንደሚታየው RuDA-NPs ጠንካራ የ PA ምልክት አሳይተዋል፣ እና በ RuDA-NP ትኩረት እና በፒኤ ሲግናል መጠን (ተጨማሪ ምስል 30A) መካከል አወንታዊ ትስስር አለ።ከዚያም በ Vivo PA ውስጥ የቲሞር ቦታዎች ምስሎች የተመዘገቡት ከተከተቡ በኋላ በተለያየ ጊዜ ውስጥ RuDA እና RuDA-NP በደም ውስጥ ከተከተቡ በኋላ ነው.በስእል 7B ላይ እንደሚታየው የሩዳ-ኤንፒኤስ ከዕጢው ቦታ የፒኤ ምልክት ከጊዜ ወደ ጊዜ እየጨመረ እና ከመርፌ በኋላ በ 8 ሰአታት ውስጥ ከፍ ያለ ቦታ ላይ ደርሷል, ይህም በ ICP-MS ትንተና ከተወሰኑ የቲሹ ስርጭት ውጤቶች ጋር ይጣጣማል.ከ RuDA (ተጨማሪ ምስል 30B) ጋር በተያያዘ ከፍተኛው የፒኤ ሲግናል መጠን ከ 4 ሰዓታት በኋላ በመርፌ መወጋት ታየ ፣ ይህም የ RuDA ወደ ዕጢው በፍጥነት የመግባት ፍጥነት ያሳያል።በተጨማሪም የ RuDA እና RuDA-NPs የማስወጣት ባህሪ በሽንት እና በሰገራ ውስጥ ያለውን የሩተኒየም መጠን በመወሰን ICP-MS ን በመጠቀም ተመርምሯል።የሩዳ (ተጨማሪ ምስል 31) እና ሩዳ-ኤንፒ (ምስል 7ሲ) የማስወገጃ ዋና መንገድ በሠገራ በኩል ሲሆን በ 8 ቀናት የጥናት ጊዜ ውስጥ የ RuDA እና RuDA-NPs ውጤታማ ማጽዳት ታይቷል ይህም ማለት RuDA እና RuDA-NPs ያለረጅም ጊዜ መርዛማነት ከሰውነት በብቃት ሊወገዱ ይችላሉ።
A. Ex vivo የRuDA-NP የመዳፊት ቲሹዎች ስርጭት የሚወሰነው በመርፌ ከተከተቡ በኋላ በተለያዩ ጊዜያት በሩ ይዘት (በአንድ ግራም ቲሹ የሚተዳደር የሩ (መታወቂያ) መቶኛ) ነው።መረጃ አማካይ ± መደበኛ መዛባት (n = 3) ናቸው። ያልተጣመሩ፣ ባለ ሁለት ጎን t ሙከራዎች *p <0.05፣ **p <0.01፣ እና ***p <0.001። ያልተጣመሩ፣ ባለ ሁለት ጎን t ሙከራዎች *p <0.05፣ **p <0.01፣ እና ***p <0.001። Непарные двусторонние t-критерии * ገጽ <0,05, ** p <0,01 እና *** p <0,001. ያልተጣመሩ ባለ ሁለት ጭራ ቲ- ሙከራዎች *p<0.05፣ **p<0.01 እና ***p<0.001።未配对的双边t 检验*p <0.05,**p <0.01 和***p <0.001.未配对的双边t 检验*p <0.05,**p <0.01 和***p <0.001. Непарные двусторонние t-teсты * p <0,05, ** p <0,01 እና *** p <0,001. ያልተጣመሩ ባለ ሁለት ጭራ ቲ- ሙከራዎች *p<0.05፣ **p<0.01 እና ***p<0.001።የቢ ፒኤ ምስሎች በ 808 nm አበረታች የሩዳ-ኤንፒኤስ (10 μmol kg-1) በደም ሥር ከተወሰደ በኋላ በተለያዩ ጊዜያት የሚታዩ የ Vivo ዕጢ ቦታዎች።የRuDA NPs (10 μmol kg-1) በደም ሥር ከተወሰደ በኋላ፣ ሲ ሩ በተለያዩ ጊዜያት ሽንት እና ሰገራ ካላቸው አይጦች ወጥቷል።መረጃ አማካይ ± መደበኛ መዛባት (n = 3) ናቸው።
በ Vivo ውስጥ የ RuDA-NP የማሞቅ አቅም በንፅፅር ከ MDA-MB-231 እና RuDA ዕጢዎች ጋር እርቃናቸውን አይጥ ላይ ተምሯል።በለስ ላይ እንደሚታየው.8A እና ተጨማሪ ምስል 32, የቁጥጥር (የጨው) ቡድን ከ 10 ደቂቃዎች ተከታታይ ተጋላጭነት በኋላ አነስተኛ የሙቀት ለውጥ (ΔT ≈ 3 ° ሴ) አሳይቷል.ይሁን እንጂ የRuDA-NPs እና የRuDA የሙቀት መጠን በከፍተኛ ፍጥነት በ 55.2 እና 49.9 °C በከፍተኛ ፍጥነት ጨምሯል, ይህም ለ Vivo ካንሰር ሕክምና በቂ የሆነ hyperthermia ይሰጣል.ለ RuDA NPs (ΔT ≈ 24 ° C) ከ RuDA (ΔT ≈ 19 ° ሴ) ጋር ሲነፃፀር የሚታየው ከፍተኛ ሙቀት መጨመር በ EPR ተጽእኖ ምክንያት በቲሹ ቲሹዎች ውስጥ በተሻለ ሁኔታ መበላሸቱ እና መከማቸቱ ምክንያት ሊሆን ይችላል.
የኢንፍራሬድ የሙቀት ምስሎች ከ MDA-MB-231 ዕጢዎች ጋር በ 808 nm ሌዘር በተለያየ ጊዜ ከ 8 ሰአታት በኋላ.ከእያንዳንዱ ቡድን የአራት ባዮሎጂካል ድግግሞሾች ተወካይ ምስሎች ይታያሉ.B አንጻራዊ ዕጢ መጠን እና C በሕክምና ወቅት የተለያዩ አይጦች ቡድኖች አማካይ ዕጢ ብዛት.D የተለያዩ የአይጦች ቡድን የሰውነት ክብደት ኩርባዎች።ከ 808 nm የሞገድ ርዝመት ጋር በሌዘር በ 0.5 W / cm2 ኃይል ለ 10 ደቂቃዎች (300 ጄ / ሴሜ 2).የስህተት አሞሌዎች፣ አማካኝ ± መደበኛ መዛባት (n = 3)። ያልተጣመሩ፣ ባለ ሁለት ጎን t ሙከራዎች *p <0.05፣ **p <0.01፣ እና ***p <0.001። ያልተጣመሩ፣ ባለ ሁለት ጎን t ሙከራዎች *p <0.05፣ **p <0.01፣ እና ***p <0.001። Непарные двусторонние t-критерии * ገጽ <0,05, ** p <0,01 እና *** p <0,001. ያልተጣመሩ ባለ ሁለት ጭራ ቲ- ሙከራዎች *p<0.05፣ **p<0.01 እና ***p<0.001።未配对的双边t 检验*p <0.05,**p <0.01 和***p <0.001.未配对的双边t 检验*p <0.05,**p <0.01 和***p <0.001. Непарные двусторонние t-teсты * p <0,05, ** p <0,01 እና *** p <0,001. ያልተጣመሩ ባለ ሁለት ጭራ ቲ- ሙከራዎች *p<0.05፣ **p<0.01 እና ***p<0.001። E H&E ዋና ዋና የአካል ክፍሎች እና ዕጢዎች ምስሎች ከተለያዩ የሕክምና ቡድኖች፣ ሳሊን፣ ሳሊን + ሌዘር፣ ሩዳኤ፣ ሩዳኤ + ሌዘር፣ RuDA-NPs እና RuDA-NPs + Laser ቡድኖችን ጨምሮ። E H&E ዋና ዋና የአካል ክፍሎች እና ዕጢዎች ምስሎች ከተለያዩ የሕክምና ቡድኖች፣ ሳሊን፣ ሳሊን + ሌዘር፣ ሩዳኤ፣ ሩዳኤ + ሌዘር፣ RuDA-NPs እና RuDA-NPs + Laser ቡድኖችን ጨምሮ። Изображения окрашивания E H&E основных органов и опухолей из разных групп лечения, включая группы физиологического раствора, физиологического раствора + лазера, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs и RuDA-NPs + Laser. E H&E ከተለያዩ የሕክምና ቡድኖች የሚመጡ ዋና ዋና የአካል ክፍሎች እና ዕጢዎች ምስሎች፣ ሳሊን፣ ሳላይን + ሌዘር፣ ሩዳኤ፣ ሩዳኤ + ሌዘር፣ ሩዳ-ኤንፒኤስ፣ እና RuDA-NPs + Laser ቡድኖች።来自不同治疗组的主要器官和肿瘤的E H&E 染色图像，包括盐水、盐水+ 激兀、ሩዳ +ሩዳ +ሩዳ +ሩዳ来自不同治疗组的主要器官和肿瘤的E H&E Окрашивание E H&E основных органов и опухолей из различных групп лечения, включая физиологический раствор, физиологический раствор + лазер, RuDA, RuDA + лазер, RuDA-NPs и RuDA-NPs + лазер. E H&E ዋና ዋና የአካል ክፍሎች እና ዕጢዎች ከተለያዩ የሕክምና ቡድኖች ሳላይን ፣ ሳሊን + ሌዘር ፣ ሩዳኤ ፣ ሩዳ + ሌዘር ፣ ሩዳ-ኤንፒኤስ እና ሩዳ-ኤንፒኤስ + ሌዘርን ያጠቃልላል።የመጠን አሞሌ፡ 60µm
የፎቶ ቴራፒ ሕክምና ከRuDA እና RuDA NPs ጋር የሚኖረው ተፅዕኖ የተገመገመ ሲሆን ራቁት አይጥ ከMDA-MB-231 ዕጢዎች ጋር በደም ሥር ከRuDA ወይም RuDA NPs ጋር በአንድ ጊዜ በ10.0 µmol kg-1 በጅራ ደም ሥር የተወጉ ሲሆን ከዚያም 8 መርፌ ከተከተቡ በኋላ ሰዓታት.የጨረር ጨረር ከ 808 nm የሞገድ ርዝመት ጋር።በስእል 8B ላይ እንደሚታየው የሳላይን እና የሌዘር ቡድኖች ውስጥ ዕጢዎች በከፍተኛ ሁኔታ ጨምረዋል, ይህም ሳላይን ወይም ሌዘር 808 ​​irradiation በእብጠት እድገት ላይ አነስተኛ ተጽእኖ እንዳለው ያሳያል.ልክ እንደ ሳላይን ቡድን ፣ የጨረር ጨረር በማይኖርበት ጊዜ በRuDA-NPs ወይም RuDA በሚታከሙ አይጦች ላይ ፈጣን ዕጢ እድገት ታይቷል ፣ ይህም ዝቅተኛ የጨለማ መርዛማነታቸውን ያሳያል።በተቃራኒው ፣ ከጨረር ጨረር በኋላ ፣ ሁለቱም RuDA-NP እና RuDA ሕክምና ከጨው ሕክምና ቡድን ጋር ሲነፃፀር በ 95.2% እና በ 84.3% የዕጢ መጠን ቅነሳ ጋር ጉልህ የሆነ የእጢ ማገገሚያ ፈጥረዋል ፣ ይህም እጅግ በጣም ጥሩ የሆነ PDT ያሳያል።, በRuDA/CHTV ተጽእኖ መካከለኛ።- NP ወይም Ore ከ RuDA ጋር ሲነጻጸር, RuDA NPs የተሻለ የፎቶቴራፕቲክ ተጽእኖ አሳይቷል, ይህም በዋነኝነት በ RuDA NPs EPR ተጽእኖ ምክንያት ነው.የቲሞር እድገት መከልከል ውጤቶች በህክምናው ቀን 15 ላይ በተቆረጠው ዕጢ ክብደት የበለጠ ተገምግመዋል (ምስል 8C እና ተጨማሪ ምስል 33)።በRuDA-NP የታከሙ አይጦች እና RUDA የታከሙ አይጦች ውስጥ ያለው አማካይ ዕጢ 0.08 እና 0.27 ግ ነው፣ ይህም ከቁጥጥር ቡድን (1.43 ግ) በጣም ቀላል ነበር።
በተጨማሪም የ RuDA-NPs ወይም RuDA በ Vivo ውስጥ ያለውን ጥቁር መርዛማነት ለማጥናት የአይጦች የሰውነት ክብደት በየሶስት ቀናት ይመዘገባል።በስእል 8D ላይ እንደሚታየው ለሁሉም የሕክምና ቡድኖች በሰውነት ክብደት ላይ ምንም ልዩ ልዩነት አልታየም. በተጨማሪም ሄማቶክሲሊን እና ኢኦሲን (H&E) ዋና ዋና የአካል ክፍሎች (ልብ, ጉበት, ስፕሊን, ሳንባ እና ኩላሊት) የተለያዩ የሕክምና ቡድኖች ተካሂደዋል. በተጨማሪም የሄማቶክሲሊን እና ኢኦሲን (H&E) ዋና ዋና የአካል ክፍሎች (ልብ, ጉበት, ስፕሊን, ሳንባ እና ኩላሊት) ከተለያዩ የሕክምና ቡድኖች የተውጣጡ ናቸው. Кроме того, было проведено окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) основных органов (сердца, печени, селезенки, легких и почек) из разных групп лечения. በተጨማሪም hematoxylin እና eosin (H&E) ከተለያዩ የሕክምና ቡድኖች ዋና ዋና የአካል ክፍሎች (ልብ, ጉበት, ስፕሊን, ሳንባ እና ኩላሊት) ቀለም ተካሂደዋል.此外，对不同治疗组的主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏）要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏）要器官（心脏！ (H&E) Кроме того, проводили окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) основных органов (сердца, печени, селезенки, легких и почек) в различных группах лечения. በተጨማሪም, ሄማቶክሲሊን እና eosin (H&E) ዋና ዋና የአካል ክፍሎች (ልብ, ጉበት, ስፕሊን, ሳንባ እና ኩላሊት) ቀለም በተለያዩ የሕክምና ቡድኖች ውስጥ ተካሂደዋል.በስእል ላይ እንደሚታየው.8E፣ ከRuDA-NPs እና RuDA ቡድኖች የአምስት ዋና ዋና የአካል ክፍሎች የኤች ኤንድ ኢ ቀለም ምስሎች ምንም ግልጽ ያልተለመዱ ወይም የአካል ጉዳቶች አያሳዩም። 8E፣ ከRuDA-NPs እና RuDA ቡድኖች የአምስት ዋና ዋና የአካል ክፍሎች የኤች ኤንድ ኢ ቀለም ምስሎች ምንም ግልጽ ያልተለመዱ ወይም የአካል ጉዳቶች አያሳዩም።በለስ ላይ እንደሚታየው.8E, изображения окрашивания H&E пяти основных органов из групп ሩዳ-ኤንፒስ እና ሩዳ 8E፣ H&E አምስት ዋና ዋና የአካል ክፍሎች ከRuDA-NPs እና RuDA ቡድኖች የተገኙ ምስሎች ምንም ግልጽ የአካል ብልቶች ወይም ጉዳቶች አያሳዩም።如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 的五个主要器官的H&E如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 组的五个主要器官的H&E Как показано на рисунке 8E, изображения окрашивания H&E ፔጃቲን በስእል 8E ላይ እንደሚታየው H&E አምስቱ ዋና ዋና የአካል ክፍሎች ከRuDA-NPs እና RuDA ቡድኖች የተውጣጡ ምስሎች ምንም አይነት ያልተለመዱ ወይም የአካል ጉዳት አላሳዩም።እነዚህ ውጤቶች RuDA-NP ወይም RuDA በ Vivo ውስጥ የመርዛማነት ምልክቶች አላሳዩም. ከዚህም በላይ፣ የኤች ኤንድ ኢ እብጠቶች ምስሎች እንደሚያሳዩት ሁለቱም የRuDA + Laser እና RuDA-NPs + Laser ቡድኖች ከባድ የካንሰር ሕዋስ ውድመት ሊያስከትሉ እንደሚችሉ ያሳያሉ፣ ይህም በ RuDA እና RuDA-NPs ውስጥ እጅግ በጣም ጥሩ የፎቶቴራፒዩቲክ ውጤታማነትን ያሳያል። ከዚህም በላይ፣ የኤች ኤንድ ኢ እብጠቶች ምስሎች እንደሚያሳዩት ሁለቱም የRuDA + Laser እና RuDA-NPs + Laser ቡድኖች ከባድ የካንሰር ሕዋስ ውድመት ሊያስከትሉ እንደሚችሉ ያሳያሉ፣ ይህም በ RuDA እና RuDA-NPs ውስጥ እጅግ በጣም ጥሩ የፎቶቴራፒዩቲክ ውጤታማነትን ያሳያል።በተጨማሪም፣ ሄማቶክሲሊን-ኢኦሲን የቆሸሸ እጢ ምስሎች እንደሚያሳዩት ሁለቱም የRuDA+Laser እና RuDA-NPs+Laser ቡድኖች የካንሰር ሕዋሳት ከፍተኛ ውድመት ሊያስከትሉ እንደሚችሉ፣ ይህም የRuDA እና RuDA-NPs በ Vivo ውስጥ ያለውን የላቀ የፎቶቴራፒዩቲክ ውጤታማነት ያሳያል።此外，肿瘤的H&E 染色图像显示，RuDA + Laser 和RuDA-NPs + Laser此外፣ 肿瘤 的 & e 染色显示፣ ሩዳ + ሌዘር 和 ruda-nps + laser 组均 导致. . .በተጨማሪም የሂማቶክሲሊን እና የኢኦሲን ቀለም ያላቸው ዕጢ ምስሎች ሁለቱም RuDA + Laser እና RuDA-NPs + Laser ቡድኖች የካንሰር ህዋሶችን በከፍተኛ ሁኔታ መውደማቸውን ያሳያሉ, ይህም የ RuDA እና RuDA-NPs በ Vivo ውስጥ የላቀ የፎቶቴራፒ ሕክምናን ያሳያል.
በማጠቃለያው የ Ru (II) -arene (RuDA) ኦርጋሜታል ኮምፕሌክስ ከ DA-type ligands ጋር የተቀናጀው የመሰብሰቢያ ዘዴን በመጠቀም የ ISC ሂደትን ለማመቻቸት ነው.የተቀነባበረ ሩዲኤ በኮቫለንት ባልሆኑ መስተጋብሮች ራሱን በመገጣጠም RUDA የተገኘ ሱፕራሞለኩላር ሲስተሞችን ይፈጥራል፣ በዚህም የ1O2 ምስረታ እና ቀልጣፋ የፎቶተርማል ለውጥን ለብርሃን-አመጣጣኝ የካንሰር ህክምና።ሞኖሜሪክ ሩዲኤ 1O2ን በሌዘር ጨረር በ 808 nm አላመነጨም ፣ ነገር ግን በተቀናጀ ሁኔታ ውስጥ ከፍተኛ መጠን ያለው 1O2 ማመንጨት ይችላል ፣ ይህም የዲዛይን ምክንያታዊነት እና ቅልጥፍናን ያሳያል።ተከታይ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የሱፕራሞለኩላር ስብሰባ ለ PDT እና ለፒቲቲ ማቀነባበሪያ በጣም የሚፈለጉትን እንደ ቀይ ሹፍት መምጠጥ እና የፎቶ ኬሚካሎችን የመሳሰሉ የተሻሻለ የፎቶፊዚካል እና የፎቶኬሚካል ባህሪያትን ለ RuDA ይሰጣል።በብልት ውስጥም ሆነ በቪቮ ሙከራዎች እንደሚያሳዩት RuDA NPs ጥሩ ባዮኬሚካቲቲቲቲ እና እብጠቱ ውስጥ ያለው ጥሩ ክምችት በሌዘር ጨረር ላይ በ 808 nm የሞገድ ርዝመት ውስጥ እጅግ በጣም ጥሩ ብርሃን-የሚፈጠር ፀረ-ነቀርሳ እንቅስቃሴን ያሳያሉ።ስለዚህ፣ RuDA NPs እንደ ውጤታማ bimodal supramolecular PDT/PTW reagents ከ800 nm በላይ በሆነ የሞገድ ርዝመት የነቃውን የፎቶሰንሲታይዘር ስብስብ ያበለጽጋል።የሱፕራሞለኩላር ስርዓት ፅንሰ-ሀሳባዊ ንድፍ ለNIR-አክቲቭ ፎቶሴንቲዘርሮች እጅግ በጣም ጥሩ የፎቶሴንሲትሲንግ ተፅእኖዎች ቀልጣፋ መንገድን ይሰጣል።
ሁሉም ኬሚካሎች እና ፈሳሾች ከንግድ አቅራቢዎች የተገኙ እና ያለ ተጨማሪ ንፅህና ጥቅም ላይ ይውላሉ.RuCl3 የተገዛው ከBoren Precious Metals Co., Ltd. (Kunming, China) ነው።[(η6-p-cym) Ru (fendio) Cl] Cl (fendio = 1,10-phenanthroline-5,6-dione) እና 4,7-bis [4- (N, N-diphenylamino) phenyl] -5 6-Diamino-2,1,3-benzothiadiazole በቀደሙት ጥናቶች መሠረት 64,65 ተዋህዷል።NMR spectra በ Bruker Avance III-HD 600 MHz spectrometer በደቡብ ምስራቅ ዩኒቨርሲቲ የትንታኔ ፈተና ማዕከል d6-DMSO ወይም CDCl3 እንደ ሟሟ በመጠቀም ተመዝግቧል።የኬሚካል ፈረቃዎች δ በ ppm ይሰጣሉ።ከ tetramethylsilane ጋር ፣ እና የግንኙነቱ ቋሚዎች J በሄርትዝ ውስጥ ፍጹም እሴቶች ተሰጥተዋል።ባለከፍተኛ ጥራት massspectrometry (HRMS) የተከናወነው በAgilent 6224 ESI/TOF MS መሣሪያ ላይ ነው።የC፣ H እና N ኤሌሜንታል ትንተና የተደረገው በVario MICROCHNOS ኤሌሜንታር (Elementar) ላይ ነው።UV-visible spectra በ Shimadzu UV3600 spectrophotometer ላይ ተለካ።Fluorescence spectra በ Shimadzu RF-6000 spectrofluorimeter ላይ ተመዝግቧል።EPR spectra የተቀዳው በ Bruker EMXmicro-6/1 መሳሪያ ላይ ነው።የተዘጋጁት ናሙናዎች ቅርፅ እና መዋቅር በ FEI Tecnai G20 (TEM) እና ብሩከር አይኮን (ኤኤፍኤም) መሳሪያዎች ላይ በ 200 ኪሎ ቮልት ቮልቴጅ ላይ ጥናት ተካሂዷል.ተለዋዋጭ የብርሃን መበታተን (ዲኤልኤስ) በናኖብሩክ ኦምኒ ተንታኝ (ብሩክሃቨን) ላይ ተካሂዷል።የፎቶኤሌክትሮኬሚካላዊ ባህሪያት በኤሌክትሮኬሚካዊ ቅንብር (CHI-660, ቻይና) ላይ ይለካሉ.የፎቶአኮስቲክ ምስሎች የተገኙት የFUJIFILM VisualSonics Vevo® LAZR ስርዓትን በመጠቀም ነው።ኮንፊካል ምስሎች ኦሊምፐስ FV3000 ኮንፎካል ማይክሮስኮፕ በመጠቀም ተገኝተዋል።የኤፍኤሲኤስ ትንተና የተካሄደው በBD Calibur ፍሰት ሳይቶሜትር ላይ ነው።ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ (HPLC) ሙከራዎች በውሃ አሊያንስ e2695 ሲስተም 2489 UV/Vis ማወቂያን በመጠቀም ተካሂደዋል።Gel Permeation Chromatography (ጂፒሲ) ሙከራዎች በ Thermo ULTIMATE 3000 መሣሪያ ላይ ERC RefratoMax520 refractive index detector በመጠቀም ተመዝግበዋል.
[(η6-p-cym) Ru (fendio) Cl] Cl (fendio = 1,10-phenanthroline-5,6-dione) 64 (481.0 mg, 1.0 mmol), 4,7-bis[4 -(N, N-diphenylamino) phenyl] -5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazole 65 (652.0 mg, 1.0 mmol) እና glacial acetic acid (30 ml) ለ 12 ሰአታት በሪፍሊክስ ማቀዝቀዣ ውስጥ ተቀስቅሷል.ከዚያም ፈሳሹ በ rotary evaporator በመጠቀም በቫኩኦ ውስጥ ተወግዷል.የተገኘው ቅሪት በፍላሽ አምድ ክሮማቶግራፊ (ሲሊካ ጄል፣ CH2Cl2:MeOH=20:1) RuDA እንደ አረንጓዴ ዱቄት ለማግኘት ተጠርጓል (ምርት፡ 877.5 mg፣ 80%)።ፊንጢጣ.ለC64H48Cl2N8RuS፡ C 67.84፣ H 4.27፣ N 9.89 ይሰላል።ተገኝቷል፡ C 67.92, H 4.26, N 9.82.1H NMR (600 MHz፣ d6-DMSO) δ 10.04 (ሰ፣ 2H)፣ 8.98 (ሰ፣ 2H)፣ 8.15 (ሰ፣ 2H)፣ 7.79 (ሰ፣ 4H)፣ 7.44 (s፣ 8H)፣ 7.21 (መ፣ J = 31.2 Hz, 16H), 6.47 (s, 2H), 6.24 (s, 2H), 2.69 (s, 1H), 2 .25 (s, 3H), 0.99 (s, 6H).13 ሴ NMR (150 ሜ.ኤስ. (PPM), δ (PPS) 158.03, 157, 13,57, 134.5.6, 120, 12,40, 120, 120, 120.40, 103.49, 103.49, 103.49.49 , 103., 86.52, 84.75, 63.29, 30.90, 22.29, 18.83.ESI-MS፡ m/z [M-Cl]+ = 1097.25.
የ 4,7-bis [4- (N, N-diethylamino) phenyl-5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazole (L2): L2 የተዋሃደ በሁለት ደረጃዎች ነው.ፒዲ (PPh3) 4 (46 mg, 0.040 mmol) ወደ N, N-diethyl-4- (tributylstannyl) አኒሊን (1.05 g, 2.4 mmol) እና 4,7-dibromo-5,6-dinitro መፍትሄ - 2, ተጨምሯል. 1,3-benzothiadiazole (0.38 g, 1.0 mmol) በደረቅ ቶሉሊን (100 ሚሊ ሊትር).ድብልቁ በ 100 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ 24 ሰዓታት ተወስዷል.ቶሉይንን በቫኪዩኦ ውስጥ ካስወገዱ በኋላ የተገኘው ጠጣር በፔትሮሊየም ኤተር ታጥቧል።ከዚያም የዚህ ውህድ ድብልቅ (234.0 mg, 0.45 mmol) እና የብረት ዱቄት (0.30 ግራም, 5.4 ሚሜል) በአሴቲክ አሲድ (20 ሚሊ ሊትር) ውስጥ በ 80 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ 4 ሰዓታት ይቀላቅላሉ.የምላሹ ድብልቅ በውሃ ውስጥ ፈሰሰ እና የተገኘው ቡናማ ጠጣር በማጣራት ተሰብስቧል.አረንጓዴ ጠጣር (126.2 mg፣ 57% ምርት) ለመስጠት ምርቱ ሁለት ጊዜ በቫኪዩም sublimation ተጣርቶ ነበር።ፊንጢጣ.ለC26H32N6S: C 67.79, H 7.00, N 18.24 ይሰላል.ተገኝቷል፡ C 67.84, H 6.95, H 18.16.1H NMR (600 MHz፣ CDCl3)፣ δ (ppm) 7.42 (d፣ 4H)፣ 6.84 (d፣ 4H)፣ 4.09 (s፣ 4H)፣ 3.42 (d፣ 8H)፣ 1.22 (s፣ 12H)።13С NMR (150 MHz, CDCl3), δ (ppm) 151.77, 147.39, 138.07, 131.20, 121.09, 113.84, 111.90, 44.34, 12.77.ESI-MS፡ m/z [M+H]+ = 461.24.
እንደ RuDA ተመሳሳይ ሂደቶችን በመከተል ውህዶች ተዘጋጅተው ተጠርተዋል.ፊንጢጣ.ለC48H48Cl2N8RuS፡ C 61.27፣ H 5.14፣ N 11.91 የተሰላ።የተገኙት፡ C፣ 61.32፣ H፣ 5.12፣ N፣ 11.81,1H NMR (600 MHz፣ d6-DMSO)፣ δ (ppm) 10.19 (s፣ 2H)፣ 9.28 (s፣ 2H)፣ 8.09 (s፣ 2H)፣ 7.95 (ሰ፣ 4H)፣ 6.93 (ሰ፣ 4H)፣ 6.48 (መ፣ 2H)፣ 6.34 (ሰ፣ 2H)፣ 3.54 (t፣ 8H)፣ 2.80 (ኤም፣ 1H)፣ 2.33 (ሰ፣ 3H)፣ 1.31 (t፣ 12H)፣ 1.07 (ሰ፣ 6H)።13 ሴ NMR (151 ሜኤች, ሲዲኤ.ሲ., 38.06, 31.22, 29.69, 22.29, 19.19, 14.98, 12.93.ESI-MS፡ m/z [M-Cl]+ = 905.24.
RuDA በ MeOH/H2O (5/95, v/v) በ 10 μM ክምችት ውስጥ ተፈትቷል.የRuDA የመምጠጥ ስፔክትረም በየ 5 ደቂቃው የሚለካው Shimadzu UV-3600 spectrophotometer በጨረር በጨረር ብርሃን በ808 nm (0.5 W/cm2) የሞገድ ርዝመት ነው።የ ICG ስፔክተሮች ልክ እንደ መደበኛው ተመሳሳይ ሁኔታዎች ተመዝግበዋል.
የ EPR ስፔክትራ የተቀዳው በብሩከር ኤምኤምክስሚክሮ-6/1 ስፔክትሮሜትር በማይክሮዌቭ ኃይል 20 ሜጋ ዋት፣ የ 100 ጂ ቅኝት ክልል እና የመስክ ሞጁል 1 G. 2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidone ነው (TEMP) እና 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) እንደ ሽክርክሪት ወጥመዶች ጥቅም ላይ ውለዋል.የኤሌክትሮን ስፒን ሬዞናንስ ስፔክትራ ለሩዳ (50 µM) እና TEMF (20 ሚሜ) ወይም DMPO (20 ሚሜ) ድብልቅ መፍትሄዎች በሌዘር ጨረር በ808 nm (0.5 W/cm2) የሞገድ ርዝመት ተመዝግቧል።
DFT እና TD-DFT ለ RuDA በ PBE1PBE / 6-31 G *// LanL2DZ ደረጃዎች በውሃ መፍትሄ የ Gaussian ፕሮግራም 1666,67,68 ተካሂደዋል.የ HOMO-LUMO፣ ቀዳዳ እና ኤሌክትሮን ስርጭቶች ዝቅተኛ ኃይል ያለው ነጠላ ጉጉት ያለው ሁኔታ RuDA በ GaussView ፕሮግራም (ስሪት 5.0) ተጠቅመዋል።
በመጀመሪያ ደረጃ የ 1O2 RuDA የማመንጨት ውጤታማነትን ለመለካት ሞክረን ነበር የተለመደው UV-visible spectroscopy ከ ICG (ΦΔ = 0.002) ጋር በመደበኛነት, ነገር ግን የ ICG ፎቶግራፍ ማሽቆልቆል ውጤቱን በእጅጉ ጎድቷል.ስለዚህ የ1O2 RuDA የኳንተም ምርት የሚለካው በ 808 nm (0.5 W/cm2) የሞገድ ርዝመት ያለው ሌዘር ሲበራ በ 428 nm አካባቢ የ ABDA fluorescence መጠን ለውጥን በመለየት ነው።ሙከራዎች በ RuDA እና RuDA NPs (20 μM) በውሃ / DMF (98/2, v / v) ABDA (50 μM) ውስጥ ተካሂደዋል.የ 1O2 ኳንተም ምርት በሚከተለው ቀመር ይሰላል፡ ΦΔ (PS) = ΦΔ (ICG) × (rFS/APS)/(rICG/AICG)።rPS እና rICG ከፎቶሴንቲዘር እና አይሲጂ የተገኘ 1O2 ያለው የ ABDA ምላሽ ተመኖች ናቸው።APS እና AICG የፎቶሰንሲታይዘር እና ICG በ 808 nm በቅደም ተከተል መምጠጥ ናቸው።
የ AFM መለኪያዎች በ Bruker Dimension Icon AFM ስርዓት ላይ የፍተሻ ሁነታን በመጠቀም በፈሳሽ ሁኔታዎች ውስጥ ተካሂደዋል.ፈሳሽ ሴሎች ያሉት ክፍት መዋቅር በመጠቀም ሴሎቹ በኤታኖል ሁለት ጊዜ ታጥበው በናይትሮጅን ጅረት ደርቀዋል።የደረቁ ሴሎችን ወደ ማይክሮስኮፕ ኦፕቲካል ጭንቅላት አስገባ.ወዲያውኑ የናሙናውን ጠብታ ወደ ፈሳሽ ገንዳ ውስጥ አስቀምጡ እና የማይበላሽ የፕላስቲክ መርፌን እና የጸዳ መርፌን በመጠቀም በቆርቆሮው ላይ ያድርጉት።ሌላ ጠብታ በቀጥታ በናሙናው ላይ ይቀመጣል, እና የኦፕቲካል ጭንቅላት ሲወርድ, ሁለቱ ጠብታዎች ይዋሃዳሉ, በናሙና እና በፈሳሽ ማጠራቀሚያ መካከል ሜኒስከስ ይፈጥራሉ.የ AFM መለኪያዎች የተከናወኑት በ SCANASYST-FLUID V ቅርጽ ያለው ናይትራይድ ካንቴለር (ብሩከር, ጠንካራነት k = 0.7 N m-1, f0 = 120-180 kHz) በመጠቀም ነው.
የHPLC ክሮማቶግራም የተገኘው 2489 UV/Vis ማወቂያን በመጠቀም ፎኒክስ C18 አምድ (250×4.6 ሚሜ፣ 5 µm) ባለው የውሃ e2695 ሲስተም ነው።የመመርመሪያው የሞገድ ርዝመት 650 nm ነው.የሞባይል ደረጃዎች A እና B እንደቅደም ተከተላቸው ውሃ እና ሜታኖል ሲሆኑ የሞባይል ደረጃ ፍሰት መጠን 1.0 ml · ደቂቃ -1 ነበር።ቅልመት (ሟሟ ለ) እንደሚከተለው ነበር፡ 100% ከ 0 እስከ 4 ደቂቃ፣ 100% ወደ 50% ከ 5 እስከ 30 ደቂቃዎች፣ እና ወደ 100% ከ 31 እስከ 40 ደቂቃዎች ዳግም ተጀምሯል።ኦሬድ በ 50 μM ክምችት ውስጥ በሜታኖል እና በውሃ (50/50, በድምጽ) በተቀላቀለ መፍትሄ ውስጥ ተፈትቷል.የክትባት መጠን 20 μl ነበር.
የጂፒሲ ሙከራዎች የተመዘገቡት በ Thermo ULTIMATE 3000 መሳሪያ ላይ በሁለት PL aquagel-OH MIXED-H አምዶች (2×300×7.5 ሚሜ፣ 8 µm) እና ERC RefratoMax520 የማጣቀሻ ጠቋሚ ጠቋሚ ነው።የጂፒሲ አምድ በ 1 ml / ደቂቃ በ 30 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ በሚፈስስበት ጊዜ በውሃ ተሞልቷል.Ore NPs በፒቢኤስ መፍትሄ (pH = 7.4, 50 μM) ውስጥ ተፈትተዋል, የክትባት መጠን 20 μL ነው.
Photocurrents በኤሌክትሮኬሚካላዊ ቅንብር (CHI-660B, ቻይና) ላይ ይለካሉ.ሌዘር ሲበራ እና ሲጠፋ የኦፕቶኤሌክትሮኒካዊ ምላሾች (808 nm, 0.5 W / cm2) በጥቁር ሳጥን ውስጥ በ 0.5 ቮ ቮልቴጅ ይለካሉ.መደበኛ የሶስት-ኤሌክትሮድ ሴል ከኤል-ቅርፅ ያለው የመስታወት ካርበን ኤሌክትሮድ (ጂሲኢ) ጋር እንደ የሚሰራ ኤሌክትሮድ፣ መደበኛ የካሎሜል ኤሌክትሮድ (ኤስሲኢ) እንደ ማጣቀሻ ኤሌክትሮድ እና የፕላቲኒየም ዲስክ እንደ ቆጣሪ ኤሌክትሮድ ጥቅም ላይ ውሏል።የ 0.1 M Na2SO4 መፍትሄ እንደ ኤሌክትሮላይት ጥቅም ላይ ይውላል.
የሰው የጡት ካንሰር ሕዋስ መስመር MDA-MB-231 የተገዛው ከ KeyGEN Biotec Co., LTD (Nanjing, China, ካታሎግ ቁጥር: KG033) ነው.ሴሎች በዱልቤኮ የተቀየረ ኢግል መካከለኛ (ዲኤምኤም፣ ከፍተኛ ግሉኮስ) በ10% የፅንስ ቦቪን ሴረም (FBS)፣ ፔኒሲሊን (100 μግ/ሚሊ) እና ስትሬፕቶማይሲን (100 μg/ml) መፍትሄ ተጨምረው በሞኖላይየሮች ውስጥ ይበቅላሉ።ሁሉም ህዋሶች በ 37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ 5% ካርቦሃይድሬት (CO2) ባለው እርጥበት አዘል ከባቢ አየር ውስጥ ተሰርተዋል።
የኤምቲቲ ምርመራ የ RuDA እና RuDA-NPs የብርሃን ጨረር መኖር እና አለመኖር, በ Vc (0.5 mM) ወይም ያለሱ ሳይቲቶክሲካዊነት ለመወሰን ጥቅም ላይ ውሏል.MDA-MB-231 የካንሰር ህዋሶች በ96-ጉድጓድ ሳህኖች ውስጥ በግምት 1 x 105 ሴል/ሚሊ/ጉድጓድ ባለው የሴል ጥግግት ውስጥ ይበቅላሉ እና ለ 12 ሰአታት በ 37.0 ° ሴ በከባቢ አየር ውስጥ 5% CO2 እና 95% አየር ይከተላሉ።በውሃ ውስጥ የሚሟሟ RuDA እና RuDA NPs ወደ ሴሎች ተጨምረዋል.ከ 12 ሰአታት ቆይታ በኋላ ሴሎቹ በ 0.5 W ሴ.ሜ -2 ሌዘር ጨረር በ 808 nm የሞገድ ርዝመት ለ 10 ደቂቃዎች (300 J ሴ.ሜ -2) እና ከዚያም ለ 24 ሰዓታት በጨለማ ውስጥ ይከተላሉ.ከዚያም ሴሎቹ በ MTT (5 mg / ml) ለሌላ 5 ሰአታት ተወስደዋል.በመጨረሻ፣ ሚዲውን ወደ DMSO (200 μl) በመቀየር ያስከተለውን ወይንጠጅ ቀለም ፎርማዛን ክሪስታሎች ለመቅለጥ።የኦዲ እሴቶች የሚለካው 570/630 nm የሞገድ ርዝመት ያለው የማይክሮፕሌት አንባቢን በመጠቀም ነው።የእያንዳንዱ ናሙና የ IC50 ዋጋ ቢያንስ ከሶስት ገለልተኛ ሙከራዎች ከተገኙት የመጠን ምላሽ ኩርባዎች የ SPSS ሶፍትዌርን በመጠቀም ይሰላል።
MDA-MB-231 ህዋሶች በ RuDA እና RuDA-NP በ 50 μM ክምችት ተይዘዋል.ከ 12 ሰአታት ቆይታ በኋላ ሴሎቹ በሌዘር በ 808 nm የሞገድ ርዝመት እና በ 0.5 W / cm2 ኃይል ለ 10 ደቂቃ (300 ጄ / ሴሜ 2) በጨረር ተጭነዋል.በቫይታሚን ሲ (ቪሲ) ቡድን ውስጥ ሴሎች በሌዘር ጨረር ከመውጣቱ በፊት በ 0.5 ሚሜ ቪ.ሲ.ከዚያም ሴሎች ለተጨማሪ 24 ሰአታት በጨለማ ውስጥ ይንከባከባሉ, ከዚያም በካልሴይን AM እና በ propidium iodide (20 μg / ml, 5 μl) ለ 30 ደቂቃዎች ተበክለዋል, ከዚያም በ PBS (10 μl, pH 7.4) ይታጠባሉ.የተበከሉ ሴሎች ምስሎች.